Technische Universität München

The Entrepreneurial University

 
Todas las muestras son solo analizadas por los laboratorios acreditados de WADA (solamente hay 33 laboratorios por todo el mundo). Los laboratorios acreditados de WADA obligatoriamente tienen que utilizar el Código Mundial Antidopaje, un Estándar Internacional para los Laboratorios. Constituye un Estándar Internacional obligatorio del nivel 2 desarrollado como parte del Programa Mundial Antidopaje. El equipamiento es estipulado como sigue:

Cromatografía de gases (GC) con espectrometría de masa (MS) y espectrometría de masa tándem (MS/MS)

… para detectar estimulantes, narcóticos, diuréticos, esteroides, beta-bloqueantes, etc.

Se utiliza una cromatografía de gases para separar compuestos volátiles. Los compuestos separados se dirigen a la fuente de iones (en línea) de un espectrómetro de masa (detector), que consiste en un filamento metálico con alto voltaje. Se ionizan los compuestos y el cociente de su masa-carga es proporcional a los iones intactos detectados (MS). Usando un espectrómetro de masa tándem los compuestos se pueden hacer fragmentos, dando patrones previsibles. Estos patrones pueden ser usados para incrementar la identificación de compuestos (ion-precursor) usando MS/MS.    

Cromatografía líquida (LC) con detección UV/VIS o espectrometría de masa (MS) y espectrometría de masa tándem (MS/MS)

… para detectar glucocorticoides, estimulantes, narcóticos, diuréticos, etc.

La cromatografía líquida separa cromatográficamente compuestos solubles antes de que se analicen en el detector. Esto es debido a su absorbancia (detector de UV/VIS) o al cociente de su masa-carga (espectrómetro de masa). El método se diferencia del GC/MS en que la fase móvil es líquida, generalmente una combinación de agua y de solventes orgánicos, en vez del gas.  

Cromatografía de gases con combustión y espectrometría de masa de relación isotópica (GC/C/IRMS)

… para distinguir los esteroides endógenos y exógenos.

La espectrometría de masa de relación isotópica (IRMS) es una especialización de la espectrometría de masa, en la cual los métodos espectrométricos de masa se utilizan para medir la abundancia relativa de isótopos en una muestra dada. El espectrómetro de relación isotópica permite una medida exacta de las mezclas de isótopos estables. Es mucho más exacto que un espectrómetro convencional porque las medidas se repiten muchas veces. Las entradas duales del instrumento permiten una repetición fiable de medidas, suministrando una corriente continua de la referencia y de la muestra de gases que son cambiados secuencialmente por una válvula de cambio. Un tipo del colector de IRMS también ofrece un arsenal de “tazas de Faraday” (conductoras, recipientes del metal que neutralizan los iones mientras que ellos mismos se cargan golpeándose), el “multicolector” permite la detección simultánea de isótopos múltiples. Las muestras se deben introducir en la fase de gas alcanzada a través de la combustión, de las alimentaciones de cromatografía gaseosa o de la interceptación química. Comparando los cocientes isotópicos detectados de un estándar medido se obtiene una determinación exacta de la identificación isotópica de la muestra. Por ejemplo, los cocientes del isótopo de carbono se miden con respecto al estándar internacional para el CO2, siendo el fósil belemnite (encontrado en la formación de PeeDee, una piedra caliza formada en el período Cretácico en Carolina del Sur, los EEUU) con un cociente 13C: 12C de 0.0112372. Debido a que la diferencia entre la referencia y las muestras es a menudo muy pequeña, los cocientes del isótopo de carbono se expresan como partes por mil con respecto al estándar.  

Concentración isoeléctrica, Immunoblotting y detección de quimioluminescencia

… para el análisis de la eritropoyetina (EPO).  

La concentración isoeléctrica (IEF) discurre en un gradiente de pH y se puede utilizar solamente para las sustancias anfóteras tales como péptidos y proteínas. Las moléculas se mueven hacia el ánodo o el cátodo hasta que alcanzan una posición en el gradiente de pH donde sus cargas netas son cero. Este valor de pH se define como el “punto isoeléctrico” (pI) de la sustancia. Siendo este valor cero, el campo eléctrico no tiene ninguna influencia. El Blotting es la transferencia de moléculas grandes a la superficie de una membrana de inmovilización. Este método incrementa las posibilidades de la detección para las fracciones electroforéticas separadas porque las moléculas absorbentes en la superficie de la membrana están disponibles libremente para los ligandos macromoleculares, por ejemplo antígenos y anticuerpos. La unión específica de anticuerpos se utiliza para explorar las zonas individuales de la proteína y la señal se aumenta mediante la quimioluminescencia, por ejemplo, uniendo  a la biotina-streptavidina peroxidasa un marcador colorimétrico. Para detectar las bandas, la membrana se expone a una cámara CCD apropiada en un armario absolutamente oscuro durante un cierto periodo de tiempo.  

Analizador hematológico y citómetro

… para los parámetros hematológicos y para detectar la transfusión de sangre.

El citómetro de flujo es una técnica para contar, examinar y clasificar las partículas microscópicas suspendidas en una corriente líquido. Permite el análisis multiparamétrico simultáneo de las características físicas y/o químicas de las células que atraviesan un aparato óptico y/o electrónico de detección. Los citómetros de flujo modernos pueden analizar varios miles de partículas cada segundo en “tiempo real” y pueden separar y aislar activamente las partículas con características específicas. Un citómetro del flujo es similar a un microscopio, salvo que en vez de producir una imagen de la célula, la citrometría de flujo ofrece una cuantificación automatizada de “procesamiento de alto-rendimiento” (para una gran cantidad de células) según un sistema de parámetros.  

Análisis inmunoluminométrico

… para distinguir la hormona de crecimiento recombinante y la de la pituitaria (hGH).

Se utiliza un exceso de dos anticuerpos monoclonales antígeno-específicos que reconozcan el antígeno (hGH) en diversos dominios. El primer anticuerpo se inmoviliza en la superficie interna de un tubo. En el primer ensayo la capa de anticuerpo reconoce el hGH recombinante preferencialmente mientras que en el segundo análisis la capa de anticuerpo reconoce preferencialmente la hGH de la pituitaria. El anticuerpo secundario se marca con  luminescencia y se utiliza en común para ambos ensayos. La luminiscencia es detectada usando un luminómetro automático.  

Método de análisis flurométrico

… para detectar hormonas peptídicas.

La espectroscopía de fluorescencia, también llamada fluorometría o espectrofluorimetría, es un tipo de espectroscopía electromagnética que analiza la fluorescencia de una muestra. Los electrones de una molécula son excitados por un haz de luz que generalmente es luz ultravioleta. Esto causa la emisión de luz en una energía más baja, pero no necesariamente luz visible. Una técnica complementaria es la espectroscopia de absorción. Los dispositivos que miden fluorescencia se llaman los fluorómetros o fluorímetros.
drucken 

www.doping-prevention.com